內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法及內(nèi)皮微粒的表達(dá)

內(nèi)皮細(xì)胞是每個(gè)組織中不可少的傳導(dǎo)工具，包括萬(wàn)惡的腫瘤，也是在初發(fā)階段，血管先擴(kuò)增一波，從而大面積進(jìn)攻組織，內(nèi)皮細(xì)胞怎么提取培養(yǎng)呢？

原代內(nèi)皮細(xì)胞分離一般采用的是組織酶消化法，不要天真的以為您只要酶消化下來(lái)的細(xì)胞都是內(nèi)皮細(xì)胞了 ，有可能也有成纖維細(xì)胞哦 ，這就牽扯到怎么抑制成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)，讓內(nèi)皮細(xì)胞趕快成長(zhǎng)起來(lái)的方法了。

內(nèi)皮細(xì)胞一般采用內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基來(lái)維持細(xì)胞生長(zhǎng)，需要注意的是才分離出來(lái)的細(xì)胞一般都不會(huì)采用無(wú)血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，因?yàn)闊o(wú)血清的培養(yǎng)基可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞會(huì)有不貼壁的現(xiàn)象發(fā)生，需要更換無(wú)血清培養(yǎng)方式需等細(xì)胞穩(wěn)定后才可開(kāi)始更換無(wú)血清組分，按比列循序漸進(jìn)更適合細(xì)胞的生長(zhǎng)，這也是有些老師在提取原代的時(shí)候使用細(xì)胞包被液包被培養(yǎng)瓶的原因。 

  內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候?qū)ε囵B(yǎng)基的要求很高，即使是細(xì)胞株HMEC-1也必須要使用MCDB這種不是很常規(guī)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基 ，然后加血清，加EGF,加胰島素才能好好生長(zhǎng)，所以細(xì)胞培養(yǎng)方式不對(duì) ，努力就會(huì)白費(fèi)，不要用很激進(jìn)的方法去改變?nèi)魏渭?xì)胞的培養(yǎng)方式 ，因?yàn)檫@樣會(huì)讓細(xì)胞的部分基因丟失從而導(dǎo)致細(xì)胞變異；內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)需要勤換液，因?yàn)樗麄兊姆置诒容^多，特別在代次不好的時(shí)候會(huì)很明顯。

   原代內(nèi)皮細(xì)胞一個(gè)特別顯著的特征就是在細(xì)胞代次比較好的時(shí)候它們消化需要的時(shí)間特別短，彷佛這邊才加上胰酶那邊就馬上需要終止了 ，對(duì)胰酶比較敏感，而傳代次數(shù)太多的細(xì)胞或者內(nèi)皮細(xì)胞株就表現(xiàn)不一樣了 ，加上胰酶之后它就像個(gè)沒(méi)有睡醒的孩子一樣 “吹吹打打"才能下來(lái)。

內(nèi)皮微粒具有轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、RNA等信號(hào)分子的功能，在調(diào)節(jié)血栓形成、動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、炎癥反應(yīng)、血管功能中發(fā)揮著重要作用。

  內(nèi)皮微粒表達(dá)很多內(nèi)皮特異性的分子，如CD31、CD146、CD62E、CD51 CDl44， 凋亡誘導(dǎo)下的內(nèi)皮微粒CD31、CDl05表達(dá)增加，促活化因子誘導(dǎo)下CD54、CD62E表達(dá)增加；促血栓形成狀態(tài)下，內(nèi)皮微粒表面的促凝血因子active tissue factor （TF） 、platelet factor 3表達(dá)增加。由于內(nèi)皮微粒表面攜帶有大量?jī)?nèi)皮細(xì)胞的表面蛋白和生物信息，在不同的病理和生理情況下表達(dá)情況發(fā)生改變，是非侵襲性的監(jiān)測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞功能的潛在標(biāo)志。

  內(nèi)皮細(xì)胞也是目前研究使用最多的原代細(xì)胞，這和它的功能密不可分，cell systems提供37種原代內(nèi)皮細(xì)胞，細(xì)胞不采用抗體分選細(xì)胞無(wú)抗性 ；單管細(xì)胞達(dá)100萬(wàn)以上的細(xì)胞量，減少您實(shí)驗(yàn)購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞的經(jīng)費(fèi)。