Starvio siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)指南--細(xì)胞狀態(tài)

RNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的影響因素有很多，而細(xì)胞狀態(tài)往往是同學(xué)們最容易忽略的一點(diǎn)。如果細(xì)胞狀態(tài)差，那么轉(zhuǎn)染時(shí)就會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞死亡、轉(zhuǎn)染效率低下等結(jié)果。那么關(guān)于細(xì)胞狀態(tài)，我們應(yīng)該注意些什么呢？

一、使用凍存復(fù)蘇后，已傳了兩三代的細(xì)胞
剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞十分脆弱，稍有不慎就會(huì)死亡，因此一切接觸細(xì)胞的動(dòng)作都要盡可能地輕柔。一般而言，細(xì)胞在凍存復(fù)蘇后的一兩代之內(nèi)或直到它們?nèi)繌?fù)蘇之前都很難轉(zhuǎn)染。建議在傳代2-3代后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，此時(shí)的細(xì)胞從解凍過程中恢復(fù)過來，并恢復(fù)正常的生長(zhǎng)速度，狀態(tài)較為穩(wěn)定。

二、細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，形態(tài)正常
1、通常情況下，細(xì)胞在快速增殖時(shí)轉(zhuǎn)染效率較高，但在停滯或死亡時(shí)轉(zhuǎn)染效率明顯下降，因而進(jìn)行小核酸轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，同時(shí)細(xì)胞比活性應(yīng)保持在90%以上，這樣才能獲得較好的轉(zhuǎn)染效率。
2、其次，細(xì)胞具有多種多樣的形態(tài)，我們?cè)谑褂眉?xì)胞時(shí)，一定要牢記它本來的形態(tài)，如球形、桿狀、星形、多角形、梭形、圓柱形等，這樣才能及時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞是否已經(jīng)變異，或是培養(yǎng)環(huán)境條件（密度、PH、培養(yǎng)基、微生物污染等）是否影響細(xì)胞正常生長(zhǎng)。

三、注意細(xì)胞污染問題
1、細(xì)胞污染一般是由于操作不規(guī)范或無菌措施不到位等引起的，如真菌、細(xì)菌、支原體、黑膠蟲、病毒、細(xì)胞交叉污染等，繼而導(dǎo)致不同程度的細(xì)胞退化、活性下降、生長(zhǎng)變緩、甚至細(xì)胞死亡。
2、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染，須立即停止實(shí)驗(yàn)并及時(shí)處理污染源，以免造成更大的影響。切勿急功近利，使用受污染的細(xì)胞，否則會(huì)造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的錯(cuò)誤、影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

以上就是針對(duì)于siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)有關(guān)于細(xì)胞狀態(tài)需要注意的方面。要知道無論是什么科研，好的實(shí)驗(yàn)材料才能鑄就好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，希望大家可以重視起來，切莫因小失大！

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在廣東，服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。