細(xì)胞培養(yǎng)中究竟要不要加抗生素？

簡(jiǎn)介： 

  提到細(xì)胞污染，大家想到較多的是細(xì)胞中的細(xì)菌、渾濁的培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶中的非法入侵者等。此外，病毒和化學(xué)污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物的健康也非常重要，確保細(xì)胞株不存在交叉污染也是獲得可重復(fù)結(jié)果的關(guān)鍵因素。

控制污染的關(guān)鍵是如何檢測(cè)出污染。

  細(xì)菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見(jiàn)的，或許能迅速殺死細(xì)胞，但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測(cè)到。相比之下，傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡無(wú)法檢測(cè)到病毒，因此病毒污染通常是在觀察到無(wú)法解釋的分離、細(xì)胞健康較差的其他跡象或甚至是細(xì)胞死亡時(shí)才被發(fā)現(xiàn)的。

總結(jié)：

抗生素雖然減少了可以觀察到的細(xì)菌、酵母等微生物的污染機(jī)會(huì)，卻會(huì)增加支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會(huì)。

因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)中污染主要來(lái)源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時(shí)攜帶支原體、病毒和其他微生物。當(dāng)抗生素使用時(shí)，可見(jiàn)污染被抑制而隱性污染又沒(méi)被注意到，這樣支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會(huì)反而增加了。Barile的一項(xiàng)研究顯示72%持續(xù)使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞有支原體污染，而不使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞支原體污染的比例只有7%

反過(guò)來(lái)如果不使用抗生素，支原體、病毒的污染往往會(huì)伴隨細(xì)菌和酵母等的污染。由于細(xì)菌和酵母等的污染很容易觀察到，污染細(xì)胞的及時(shí)清理就大大減少了支原體、病毒的污染機(jī)會(huì)。

潛在的支原體、病毒的污染會(huì)帶來(lái)很大的危害。這些微生物的存在會(huì)影響細(xì)胞的理化性質(zhì)，從而使研究者得到錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在嚴(yán)重的情況下，甚至使一個(gè)實(shí)驗(yàn)室數(shù)年的研究白白浪費(fèi)。

由于過(guò)濾技術(shù)的提高和超凈臺(tái)質(zhì)量的改進(jìn)，在規(guī)范的細(xì)胞培養(yǎng)操作過(guò)程中引進(jìn)污染的機(jī)會(huì)已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多（比如組織培養(yǎng)），或者培養(yǎng)非常珍貴的細(xì)胞株時(shí)才使用抗生素。

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