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    CaCl2 法制備感受態(tài)細(xì)胞

    發(fā)布時(shí)間： 2021-12-24　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1287次

    材料與儀器

    【 器材 】 1 ．培養(yǎng)皿 2 ．恒溫培養(yǎng)箱 【試劑 】 1 ． LB 培養(yǎng)基 2 ．選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐青霉素，終濃度為 50μg/ml ） 3 ．氨芐青霉素 100 mg/ml 4 ．宿主細(xì)菌：經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α

    步驟

    取 50 μL 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，加入適量質(zhì)粒（體積不得超過(guò) 4 μL ）冰浴 30 min 后， 42℃ 熱激 90 s ，馬上放回冰上，冰浴 2 min ；加 400 μL LB 培養(yǎng)基，于 37℃ 搖床慢搖振蕩培養(yǎng) 45-60 min ；取 50-100 μL 涂在含有氨芐青霉素（ 100 μg/mL ）的 LB 固體培養(yǎng)基上， 37℃ 倒置培養(yǎng)過(guò)夜。

    注意事項(xiàng)

    嚴(yán)格按照順序加入試劑

    以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


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